Estudo brasileiro apresentado na sessão de pôster da ESMO 2019 investigou a associação entre as citocinas salivares e marcadores de apoptose (TUNEL) e anti-apoptose (BCL-2), bem como se essas proteínas se relacionavam com mucosite oral em pacientes submetidos a transplante de células hematopoiéticas (TCH). O trabalho foi apresentado pela cirurgiã-dentista Luciana Corrêa (foto), Professora Associada da Faculdade de Odontologia da USP e assessora do curso de Pós-Graduação em Odontologia Hospital do Hospital Israelita Albert Einstein.

A apoptose de células da mucosa oral é uma das características mais predominantes na mucosite oral. Alguns estudos têm demonstrado aumento dos níveis salivares de fator de necrose tumoral alfa (TNF-a), interleucina 1 beta (IL-1b) e interleucina 6 (IL-6) depois de radioterapia e quimioterapia, fato que tem sido associado ao aparecimento de mucosite oral. Essas citocinas, principalmente TNF-a, podem participar do processo de apoptose, mas pouco se conhece sobre essa relação, considerando-se os queratinócitos da mucosa oral expostos a agentes antineoplásicos.

Métodos

Neste estudo, os pesquisadores coletaram saliva estimulada de 77 pacientes de TCH antes de iniciar o condicionamento (T0), durante o período de neutropenia (T1) e logo após a pega da medula (T2). Foi também realizada citologia esfoliativa nos mesmos períodos da coleta de saliva. As células foram submetidas a ensaios TUNEL e imunocitoquímico para Bcl-2, e posteriormente foram quantificadas as células positivas para esses marcadores. A saliva coletada foi submetida a teste imunoenzimático (ELISA) para se quantificarem os níveis de TNF-a, IL-1b e IL-6. A gradação da severidade e o tempo de duração da mucosite oral também foram registrados durante todo os períodos investigados.

Resultados

O número de células com positividade para TUNEL (p=0.021) e Bcl-2 (p=0.020) aumentou significativamente comparando-se T0 e T2. Os níveis salivares de TNF-a aumentaram na comparação entre T0 e T1 (p<0.001); já para IL-1B e IL-6 não se observaram diferenças estatísticas. Houve correlação positiva significativa entre TNF-a e TUNEL em T0 (rho=0.277, p=0.033) e T1 (rho=0.451, p=0.020). A expressão de Bcl-2 em T1 (rho=-0.335, p=0.048) exibiu correlação negativa com tempo de duração de mucosite oral.

Os resultados demonstraram que as células orais exibiram apoptose mesmo depois da pega da medula. A associação entre TUNEL e TNF-a salivar sugere participação dessa citocina no processo de apoptose presente durante o período de neutropenia. Apesar da alta taxa de apoptose, as células orais também tiveram alta expressão da proteína anti-apoptótica Bcl-2, que foi inversamente proporcional ao tempo de duração de mucosite oral. Esse fato sugere o acionamento de mecanismos de sobrevivência celular pelas células da mucosa oral, que acarreta um efeito protetor, reduzindo o tempo de mucosite oral.

“O estudo demonstrou que mesmo após a pega da medula, período em que frequentemente não se notam mais sinais de mucosite oral, ainda existem células orais em apoptose. É importante considerar esse fato nos protocolos de cuidados orais, que devem ser mantidos mesmo na ausência de lesões na cavidade oral”, explicou Luciana.

“O estudo também evidenciou que a saliva exibe níveis aumentados de citocinas pró-inflamatórias, corroborando outros estudos que já tinham demonstrado a mesma situação em pacientes sob quimioterapia e radioterapia. Contudo, pela primeira vez, conseguimos verificar associação de uma dessas citocinas, a TNF-a, com a apoptose dos queratinócitos orais. Com base nesses achados, novas propostas de tratamentos tópicos para mucosite oral poderiam ser estudadas, principalmente envolvendo inibidores de TNF-a”, concluiu.

O trabalho foi realizado com recursos financeiros da Fapesp (Proc. n. 2016-03650-4) e do Projeto AmigOH.

Referência: Salivary cytokines and oral mucosa cells apoptosis in patients during hematopoietic cell transplantation: possible relationship with oral mucositis - L. Corrêa1, L.M. Bezinelli2, F.C.P. Rosin3, M.H. Ferreira2, D.L.C. Carvalho2, R.M.D.G. Lopes2, N. Hamerschlak2, F.D.P. Eduardo2 - Annals of Oncology (2019) 30 (suppl_5): v718-v746. 10.1093/annonc/mdz265