Franklin Pimentel (foto), da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (USP), é autor de estudo selecionado para apresentação no SABCS 2019 que comparou a ligação e as atividades biológicas do trastuzumabe biossimilar e do medicamento de referência em associação com o pertuzumabe. Os resultados demonstraram que o biossimilar em combinação com o pertuzumabe é altamente similar à combinação com o medicamento originador.
O trastuzumabe é aprovado para o tratamento do câncer de mama HER2+ em diferentes indicações e esquemas, e a associação de pertuzumabe em alguns regimes demonstrou melhorar o benefício clínico.
Estudos comparativos entre o trastuzumabe biossimilar e o trastuzumabe originador provaram que esses novos produtos biológicos são altamente semelhantes em estrutura e atividade biológica, e a micro-heterogeneidade inerente não é clinicamente relevante, uma vez que estudos de fase III demonstraram eficácia, segurança e imunogenicidade equivalentes.
Neste estudo, os pesquisadores buscaram comparar as atividades biológicas e de ligação do trastuzumabe biossimilar (BS-TZB) ou do trastuzumabe de referência (TZB) em associação com o pertuzumabe (PTZ) em ensaios baseados em cultura de células.
Métodos
Duas linhagens celulares de câncer foram utilizadas para realizar todos os testes: BT474 (HER2+/receptor de estrogênio (ER) e receptor de progesterona (PR) positivos) e HCC1954 (HER2+/ PR e ER-negativos). Foi feita marcação fluorescente do trastuzumabe de referência (Herceptin®, Roche) com Alexa 488, do biossimilar do trastuzumabe (Zedora, Libbs Farmacêutica) com Alexa 488 e do pertuzumabe (Perjeta®, Roche) com Alexa 647. Foram realizadas avaliações de ligação ao antígeno com citometria de fluxo e microscopia das células em concentrações de: 0; 10; 100; 1.000 ng/mL em todas as combinações.
Os critérios de aceitação predefinidos para o ensaio de ligação ao ligante (LBA) foram de ± 20% (25% no limite inferior de quantificação - LLOQ). Ensaios de proliferação e CDC (citotoxicidade dependente do complemento): trastuzumabe ou trastuzumabe biossimilar foram testados em concentrações de: 0,01; 0,03; 0,1; 0,3; 1; 3; 10; 30; 100 μg/mL combinado com pertuzumabe nas concentrações 1; 10; 100 μg/mL; o número de células viáveis foi estimado por quantificação do ATP presente usando o kit CellTiter-Glo®.
Resultados
Foram realizados testes utilizando diferentes concentrações e combinações de anticorpos. Para o LBA, os resultados são mostrados com concentrações nas quais o efeito não foi mínimo nem máximo (para as duas linhas celulares: 100 ng/mL para pertuzumabe; 1.000 ng/mL para trastuzumabe originador ou biossimilar) (Tabela 1).
Para análise de proliferação e CDC, os resultados em concentrações de 100 μg/mL para pertuzumabe e trastuzumabe originador ou biossimilar (para ambas as linhagens celulares) são mostrados como uma razão para o controle.
“O trastuzumabe e o pertuzumabe se ligam ao receptor HER2 em diferentes subdomínios, agindo sinergicamente e, finalmente, melhorando o benefício clínico”, destacam os autores. Além dos achados anteriores de estrutura e atividades biológicas altamente similares entre biossimilares e o medicamento de referência, o estudo mostrou que tanto a ligação de pertuzumabe ao HER2 como a atividade biológica apresentam o mesmo padrão na presença de trastuzumabe biossimilar em comparação com o medicamento de referência”, concluem.
Table 1: Ligand-binding, proliferation and CDC assays. SD: standard deviation.
Cell line | Anti-bodies | LBA (% cells) mean ± SD | DBM 90% CI | Proliferation (ratio) mean ±SD | DBM 90% CI | CDC (% cells) mean ± SD | DBM 90% CI |
BT474 | BS-TZB + PTZ | 69.6 ±0.3 | -4.5 to -3.4 | 65.3 ±2.5 | -7.2 to -0.3 | 58.2 ±0.1 | -5.8 to -3.2 |
TZB + PTZ | 73.5 ±0.3 | 69.6 ±1.2 | 62.8 ±1.1 | ||||
HCC1954 | BS-TZB + PTZ | 94.2 ±0.3 | 5.8 to 6.4 | 80.5 ±1.9 | -14.3 to -0.3 | 49.8 ±0.1 | -4.3 to -1.9 |
TZB + PTZ | 88.1 ±0.1 | 87.8 ±5.4 | 52.9 ±1.0 |
Referência: P5-05-08. Comparative evaluation of a trastuzumab biosimilar or originator trastuzumab in association with pertuzumab: Binding and biological activities in cell culture-based assays - Franklin F Pimentel et al
